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該怎么根據(jù)樣品性質(zhì)來選擇ELISA?

更新時(shí)間:2019-06-17   點(diǎn)擊次數(shù):1455次

如果實(shí)驗(yàn)樣品為人、小鼠或大鼠樣品,那么要選擇一個合適的試劑盒相對容易,但如果您的實(shí)驗(yàn)樣品來源于其他物種如雞、牛、猴等,則市面上能提供的試劑盒種類卻很少。且不可輕信能提供近萬種試劑盒,覆蓋多物種的供應(yīng)商。但如果又非要檢測這些物種的指標(biāo)時(shí),要對待檢物(如有種屬差異性)進(jìn)行同源性分析以及試劑盒的種屬交叉反應(yīng)數(shù)據(jù)。

對于樣品類型而言,一般的商業(yè)化試劑盒都經(jīng)過血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液的驗(yàn)證。在選擇試劑盒時(shí),要詳細(xì)閱讀說明書,比如血漿樣本抗凝劑的使用是否與試劑盒兼容。另外,在某些情形下樣品中會存在干擾因素比如溶血血漿、高脂肪含量的樣品、人抗鼠抗體(HAMA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清中含胎牛血清等。因此需根據(jù)樣品來選擇試劑盒,必要時(shí)還要根據(jù)樣本來適當(dāng)優(yōu)化。

或在樣品收集前,先閱讀一些可靠供應(yīng)商試劑盒的說明書或直接咨詢。如果您的樣品為組織或細(xì)胞裂解物,則需要更謹(jǐn)慎的選擇試劑盒。市面上大多數(shù)的商業(yè)化試劑盒沒有經(jīng)過多種來源組織樣本的驗(yàn)證。這需要實(shí)驗(yàn)君能理解不是所有試劑盒所用的抗體對,都能特異的從一堆裂解物蛋白中特異檢出您的目的蛋白,還要考慮組織樣品的基質(zhì)效應(yīng)(Matrix Effect)等。

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